驾驭新应用：使用PurePep® Chorus 合成寡核苷酸

寡核苷酸药物（oligonucleotide drugs）是一类由 12–30 个核糖核苷酸经化学合成而得的单链或双链短核酸聚合物，通过 Watson-Crick 碱基互补配对，精准识别并结合靶 mRNA（或pre-mRNA），进而在基因表达层面阻断致病蛋白的产生或修正其功能，被视为继小分子、单抗之后的“第三大药物形态”。

由于具有研发周期短，靶点范围广，作用持久等优势，近年来寡核苷酸药物的研发速度进展迅速。全球已有约 18 个合成寡核苷酸药物获 FDA 批准，包括 ASO 药物 Nusinersen（SMA）、siRNA 药物 Patisiran（hATTR）等。超过 130 个项目处于临床阶段，覆盖罕见病、肿瘤、心血管、代谢及神经退行性疾病。

由于寡核苷酸的合成需要惰性条件，而 Gyros Protein Technologies 自动化多肽合成仪的核心技术 PurePep Pathway，这采用阀块系统，可在惰性气体环境下将液体从溶剂/试剂瓶移动到反应容器中。因此，我们探索了使用模块化 PurePep Chorus 合成仪将化学合成范围从多肽扩展到寡核苷酸。

2.偶联 → 0.1M 亚磷酰胺 + 0.5M 5-乙硫基四唑，2×2min

3.加帽 → Ac₂ O/二甲基砒啶/THF + NMI，2min（氧化后再加 1min 10s）

4.氧化 → 0.1 M I₂/THF-吡啶-水，2min

5.硫化（可选）→ 0.05M DDTT，1min → 生成硫代磷酸酯键

6.切割：30% NH₄OH : 40% 甲胺 = 1 : 1，室温 1h

7.纯化：DMT-on反相固相萃取 (Glen-Pak柱)，1μmol 规模

b – 全部脱保护的寡核苷酸。

c – 突变：第一个T变为c。

‘*’表示多个硫代磷酸酯键。

F – 2’-氟代dU。

1.一机两用：同一平台既可合成多肽，又可合成寡核苷酸。

2.高品质：短链 DNA/RNA 经简单柱纯化即可达到 >90% 纯度。

3.化学扩展：内置硫化模块，轻松引入硫代磷酸酯，提高体内稳定性。

4.规模灵活：5μmol 研究级 → 模块化阀块可放大至克级。

PurePep® Chorus 在惰性气体条件下，成功将合成范围从多肽扩展到短寡核苷酸，并可制备硫代磷酸酯等修饰链，为药物研发提供快速、灵活、高质量的化学供应方案。